（一）生物素及其活化
1.标记蛋白质氨基的活化生物素：N-羟基丁二酰亚胺酯（BNHS）。
2.标记蛋白质醛基的活化生物素：酰肼（BHZ）和肼化生物胞素（BCHZ）。
3.标记蛋白质巯基的活化生物素：3-（N-马来酰亚胺-丙酰）-生物胞素（MPB）。
4.标记蛋白质核酸的活化生物素：常用于标记核酸分子的活化生物素有光生物素、生物素脱氧核苷三磷酸、BNHS和BHZ。
（二）生物素标记蛋白质
生物素化蛋白质衍生物的特性生物素化蛋白质衍生物有两类：一种是生物素化的大分子生物活性物质（如抗原、抗体），另一种是标记材料（如酶）结合生物素后制成的标记物。
标记方法：（1）标记抗体、抗原：常用于标记抗体的活化生物医.学教育网搜集整理是BNHS；对于偏酸性的抗原，标记时多采用BHZ。（2）标记酶：以生物素标记HRP为例。
标记注意事项：（1）应根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质，选择相应的活化生物素和反应条件；（2）标记反应时，活化生物素与待标记抗原或抗体应有适当的比例；（3）为减少空间位阻影响，可在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构；（4）生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后，不影响后者的免疫活性；标记酶时则结果有不同。
