摘 要：目的构建含有HIV-1核心蛋白gag基因的真核表达质粒，并研究其免疫应答反应。
方法 采用PCR方法从1例HIV感染者中扩增出gag基因，构建重组质粒pcDNA-GAG。接种小鼠后，检测其抗体及抗体亚类，并对小鼠的淋巴细胞亚群进行分析，采用3H-TdR法、ELISPOT方法和51Cr释放法分别检测T淋巴细胞的增殖反应性、特异性分泌IFN-γ的CD8+T淋巴细胞以及特异性CTL杀伤活性。
结果 重组质粒体外表达目的蛋白的相对分子质量（Mr）约为55×103。免疫小鼠后可诱导产生特异性抗体，其中IgG2a与IgG的比例显著高于IgG1与IgG的比例；T淋巴细胞体外经ConA刺激后SI达到160.67，显著高于对照组（14.04，P＜0.05）；产生IFN-γ的CD8+T淋巴细胞数目以及特异杀伤率均显著高于对照组小鼠（P＜0.05）。
结论 重组质粒pcDNA-GAG可诱导小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答反应，而且ELISPOT方法检测特异性细胞免疫应答反应的结果与51Cr释放法一致，提示可用此法对DNA疫苗诱导的细胞免疫进行评价。
