黑色素瘤细胞OCM-1A中DNA甲基化对HLA-G分子表达的影响

2009-3-17 13:51 【

  摘 要:目的探讨黑色素瘤细胞OCM-1A中表观遗传因素DNA甲基化对HLA-G分子表达的影响。

  方法 利用DNA甲基化抑制剂5-aza-2‘-deoxycytidine(ADC)处理HLA-G阴性黑色素瘤细胞OCM-1A,检测经不同浓度、不同时间的ADC处理后HLA-G基因及蛋白表达的变化。序列测定分析ADC处理前后HLA-G基因启动子区220bp片段的甲基化水平,RT-PCR检测HLA-GmRNA水平的变化,Western blot检测细胞HLA-G分子合成总量以及FACS检测细胞表面HLA-G分子的表达水平。

  结果 HLA-G阴性黑色素瘤细胞OCM-1A经ADC处理后,HLA-G基因启动子区的CpG甲基化程度明显降低,诱导HLA-G基因转录,HLA-G分子获得表达。HLA-G基因及蛋白的表达水平与处理时间相关,随着处理时间的延长,HLA-G表达量上升。

  结论 OCM-1A细胞中,HLA-G基因的表达调控受DNA甲基化影响,ADC对HLA-G的表达调控具有时相性。