摘 要：目的以噬菌体展示具有天然结构的人CD28分子胞外区同二聚体，检测其抗原性和生物活性，为CD28拮抗性类肽的筛选奠定基础。
方法 RT-PCR从Jurkat细胞扩增CD28胞外区，将其克隆入噬菌粒载体pComb3HSS，构建的重组载体电转入受体菌XL1-blue，并加辅助噬菌体VCSM13，使CD28胞外区展示在噬菌体表面。以ELISA、流式细胞仪检测噬菌体展示CD28的抗原性和与B7-1的结合力。MTT法检测噬菌体展示CD28的生物活性。
结果 成功构建表达人CD28分子胞外区同二聚体的重组噬菌粒载体pComb3H-CD28，并以噬菌体展示系统展示CD28分子。ELISA和FCM结果显示，噬菌体展示CD28可与抗CD28抗体特异性结合，也可与Jurkat细胞表面CD28竞争结合抗CD28抗体，具有CD28抗原性。噬菌体展示CD28可与B7-1特异性结合，也可与Raji细胞表面CD80结合，具有与配体结合能力。体外生物活性实验显示，噬菌体展示CD28可抑制抗CD28抗体刺激的人外周血淋巴细胞增殖反应。
结论 利用噬菌体展示系统成功展示CD28同源二聚体，噬菌体展示CD28具有抗原性及生物活性，为以CD28为靶点体外筛选CD28拮抗性类肽，从而防治移植排斥反应和自身免疫病奠定了基础。
