牙周炎治疗后龈沟液弹性蛋白酶水平的变化
课前问答
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龈沟液(gingival crevicular fluid，GCF)中的弹性蛋白酶(Elastase，EA)主要源于中性多形核白细胞(polymrphonuclear leukcyte，PMN)，作为PMN的标志酶(marker)，能广泛地破坏牙周结缔组织和骨组织，而被认为与牙周组织的活动性破坏密切相关。
现有的少数研究认为，EA有可能预测未来附着丧失的发生，但对其预测能力有争议，这除了不同学者采用的活动期判断标准、检测方法、纵向观察时间不同外，还与检测的多是EA总水平有关。实际上，GCF中EA总水平有一部分是已被释放、具有活性作用的细胞外EA(EA in the supernatantI EA-s)，另一部分是还存在于MN中未被释放出来而尚无活性作用的EA(EA jn the pel 1et，EA-p)，也称细胞内EA。本实验目的是观察牙周基础治疗后这两种成分的变化，以深入了解EA在牙周炎发生中的作用 医学教 育网收集整理 。
材料和方法
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选择慢性牙周炎患者8人，全身健康，一年以上未做过牙周治疗，三个月内未服用抗生索、非甾体类药物及其它可能影响白细胞的药物，妇女未妊娠。从每位患者口腔内选1：棚邻的邻面颊侧牙周炎位点(探诊深度4mm)38个，根尖片示邻面牙槽骨有不同程度的吸收。患者不做口腔卫生指导和治疗，3～5天后复诊取GCF样本。
用滤纸条收集GCI并定量和贮存，取样前记录菌斑指数(plaque index，PLI)，取样后记录探诊深度(probing depth，PD)、附着丧失(attachment loss，AL)和出血指数(bleeding index，BI)。然后行口腔卫生指导、全口洁治及深部刮治等基础治疗。取样牙位刮治后6周复查，重复前述步骤。
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全部取样完成后，将贮存的GCF样本集集中于一天测定，采用底物(Meosuc-ala-ala-pro-val-NA,1mmol/L)检测法测定EA-s和EA-p水平。每一患者治疗前后的样本在同一块96孔酶标板上测定。
结 果
结果表明，牙周祭基治疗后6周，EA-s和EA-p总量、EA-s的浓度、酶比活性S/P(EA-s/EA-p)都比治疗前显著下降(p<0.001)，且治疗后的S/P比值均小于1，但EA-P的浓度治疗前后水平相近(p>0.05)；各临床指标显著改善(p<0.001)：AL平均增加1.48mm，PD平均减少2.72mm，PLI和BI显著降低，GCF量也显著减少，表明口腔卫生控制良好并炎症日明显减轻。
讨 论
牙周基础治疗后，临床指标显著改善，GCF量减少，进入牙周袋的PMN减少，其激活因子的作用减弱，释放的EA必然减少。因此，EA-s和EA-p均可用作疗效判断的客观指标。但治疗后S/P比值明显下降，表明EA-s的改善比EA-p明显，且EA-p的浓度在治疗前后没有明显变化，因而EA-s作为疗效判断指标则更有意义。
在EA的检测中，大多数样本中EA-p水平高于EA-s水平，尤其是治疗后的所有样本 S/P 比值均小于1，体现了细胞内EA较细胞外EA丰富。因为EA-s受到PMN数目和激活因子的双重影响，EA-p仅与PMN数目有关，故牙周组织状态相对静止、细菌和宿主间相对平衡时，S/P比值较小；反之，大量EA-p转化为EA-s，S/P比值明显升高，则意味着该部位牙刷组织的活动性破坏可能正在发生。提示，EA-s水平和S/P比值有可能成为确定牙周炎活动期的敏感的客观指标。又由于S/P比值能间接反映PMN的数量对EA的影响，是反映EA和PMN在牙周炎中作用的，一个综合指标，建议在牙周炎的诊断性研究中， EA-s利S/P比值两项指标都应观察。Cimasoni曾建议研究溶酶体源的酶时，宜考虑PMN的影响只是由于取样方法的限制而不能做到，S/P比值则实现了对EA这种研究的设想。
Cox、沙月琴等曾报道，牙周基础治疗或服用强力霉素后，EA总水平(总量和浓度)下降，但用浓度表示时比用总量表示的变化不明显，可能就是其中的EA-p浓度作用的结果。许多学者因此主张在牙周炎的诊断性实验中宜用酶总量表示，本研究结果支持此主张.
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