1、标本采集:使用EDTA-K2抗凝真空采血管,抽取静脉血2ml。
2、染色和固定细胞:
(1)标本管编号A,取一只流式专用管A1。
(2)A1管加入Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE 30ul。
(3)A1管中再加入全血50Ul,混均。
(4)置室温,避光孵育15min。
(5)加入FACSLysing溶血液2.0ml,置室温,避光孵育10min。
(6)300g离心5min,弃上清液。
(7)PBS洗涤细胞两次,300g离心5min,弃上清液。
(8)1%多聚甲醛0.5mL。
3、上机检测;分析结果;打印实验报告。