外周血淋巴细胞HLA-B27表达检测的实验步骤

2009-1-16 19:12 【 】【我要纠错

  1、标本采集:使用EDTA-K2抗凝真空采血管,抽取静脉血2ml。

  2、染色和固定细胞:

  (1)标本管编号A,取一只流式专用管A1。

  (2)A1管加入Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE 30ul。

  (3)A1管中再加入全血50Ul,混均。

  (4)置室温,避光孵育15min。

  (5)加入FACSLysing溶血液2.0ml,置室温,避光孵育10min。

  (6)300g离心5min,弃上清液。

  (7)PBS洗涤细胞两次,300g离心5min,弃上清液。

  (8)1%多聚甲醛0.5mL。

   3、上机检测;分析结果;打印实验报告。